文章導讀
外泌體是指包含多種RNA（環狀RNA、miRNA、LncRNA和mRNA等）和蛋白質的盤狀囊泡（30-200nm）。幾乎所有類型的細胞均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于各種體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁等。外泌體被視為特異性分泌的膜泡，能夠參與細胞間通訊。目前，有關外泌體分泌、攝取、內容物以及相應功能的精確分子機制的研究才剛剛起步，對外泌體的研究興趣也是日益增長。
2020年2月6日，外泌體領域大牛Raghu
Kalluri教授在Science雜志（影響因子41.037）發表了關于外泌體的綜述，該綜述介紹了外泌體的生物發生、異質性、以及細胞間通信過程，同時也分析總結了外泌體在哺乳動物的繁殖和發育、神經退行性疾病、代謝和心血管疾病、免疫反應和感染、癌癥以及在臨床診斷和治療應用等領域中的重要價值，激發了該領域的研究熱度。2020年1月2日，The
Journal of Clinical Investigation雜志（影響因子12.282）刊登了一篇外泌體lncRNA
LNMAT2促進膀胱癌淋巴轉移過程的文章。該篇文章巧妙利用多種技術揭示了外泌體lncRNA介導的淋巴轉移機制，并將LNMAT2作為膀胱癌淋巴轉移的治療靶點。
發表期刊：The Journal of Clinical Investigation
影響因子：12.282
實驗方法：LncRNA-seq、RNA pull-down+MS/WB、RIP、ChIP、雙熒光素酶報告實驗（云序可提供以上服務）
實驗樣本：淋巴轉移膀胱癌組織vs.非淋巴轉移膀胱癌組織（5 vs. 5 ）
文獻鏈接：
https://www.jci.org/articles/view/130892/pdf
文章內容
（1）LNMAT2過表達與BCa淋巴結轉移相關
作者前期通過對5對淋巴轉移膀胱癌組織（LN+）和非淋巴轉移膀胱癌組織（LN-）進行LncRNA-seq（云序可提供此服務）發現，LNMAT2在淋巴轉移膀胱癌（Bca）組織明顯上調；對266名膀胱癌組織進行qPCR，結果顯示LNMAT2在LN+中明顯上調；K-M分析顯示，LNMAT2過表達的膀胱癌病人生存率（OS）和無病生存率（DFS）明顯少于低表達LNMAT2組。這些數據說明LNMAT2過表達可能引起BCa的LN轉移。
圖注：LNMAT2過表達與BCa淋巴結轉移相關
（2）LNMAT2在BCa細胞分泌的外泌體中富集
作者利用ISH實驗發現，在BCa的胞外間隙中有較高的LNMAT2表達（D）；與LN（-）-BCa組織相比，LN（+）-BCa組織中細胞外LNMAT2的表達明顯升高。細胞外lncRNA主要被包裹在特定的亞細胞物質中（特別是外泌體），提示LNMAT2可能被BCa細胞外泌體包裹。為了驗證這一假設，作者從206例BCa患者和120例健康對照組的尿液樣本中分離出外泌體并進行qPCR實驗，發現與健康對照組相比，來自BCa患者的尿液外泌體中LNMAT2表達上調。這提示外泌體LNMAT2對BCa的發生發展有重要意義。
圖注：LNMAT2在BCa細胞分泌的外泌體中富集
（3）BCa細胞分泌的外泌體LNMAT2在體外促進淋巴生成
作者首先對BCa細胞系（5637和UM-UC-3）進行外泌體鑒定；下調/過表達LNMAT2的BCa細胞系外泌體與人淋巴內皮細胞（HLEC）共孵育，血管形成實驗和遷移實驗發現下調LNMAT2能夠抑制HLEC的血管形成和遷移，上調LNMAT2則相反；體內實驗證明，上調LNMAT2能促進淋巴生成。
圖注：BCa細胞分泌的外泌體LNMAT2在體外促進淋巴生成
（4）hnRNPA2B1介導LNMAT2包裝進入BCa細胞外泌體
為了探究LNMAT2的分子機制，作者進行LNMAT2 RNA pull-down+MS（云序可提供此服務）實驗，結果顯示hnRNPA2B1能夠與LNMAT2直接結合；為了驗證MS結果，作者進行LNMAT2 RNA pull-down+WB、RIP+qPCR（云序可提供此服務）實驗，結果顯示LNMAT2確實能夠與hnRNPA2B1直接結合；而且FISH實驗顯示LNMAT2和hnRNPA2B1能夠定位于細胞核；為了探究LNMAT2是如何進入BCa細胞外泌體的，作者在BCa細胞系中敲減hnRNPA2B，發現外泌體中LNMAT2的表達降低。這些結果說明hnRNPA2B1能夠介導LNMAT2包裝進入BCa細胞外泌體。
圖注：hnRNPA2B1介導LNMAT2包裝進入BCa細胞外泌體