使用PVDF膜時需要經過多步嚴格的封閉過程。
可以通過增加2-5倍封閉液的濃度,延長封閉時間(如封閉液孵育過夜)和在37℃下進行封閉來提高效果,通過封閉液與空位點結合來消除背景,并與膜蛋白結合降低其與一抗的非特異性結合。 一些常用封閉液有脫脂奶粉,BSA和干酪素。