在液-固吸附色譜,,液-液分配色譜這兩種液相色譜中才涉及到正相色譜及反相色譜。液-固吸附色譜(固定相是固體吸附劑,它是根據物質在固定相是吸附作用差異來分離的。吸附作用越強,K值越大,保留時間越長)液-液分配色譜(是將固定液涂在擔體上作為固定相的,它的分離原理與液液萃取的原理相同,從而服從分配定律。在固定液中溶解度大,K值大,保留時間長)。
正相色譜是指流動相的極性小于固定相的極性;反正色譜是指流動相的極性大于固定相的極性。
對于反相色譜,極性越小的物質,流動相的極性越大,保留時間越長。極性越小的物質,流動相的極性越小,保留時間越短。對于極性大的物質來說,流動相的極性對其保留時間影響較小。而正相色譜正好相反。
因此在應用上正相色譜用于分離極性較大的物質,如蛋白質、生物堿等。反相色譜多用于分離極性較小的物質,在流動相的選擇上,反相色譜的優勢更大,在實際工作中反相色譜的應用更為廣泛
2、反相色譜反相色譜用的填料常是以硅膠為基質,表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。反相色譜所使用的流動相極性較強,通常為水、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強的組份最先被......
1、正相色譜正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團,如胺基團(ZH2,APS)和氰基團(CN,CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團的極性教強,因......
抗體是免疫系統中一類重要的蛋白質,它們通過特異性方式來結合抗原。這一特性使之在診斷、治療、基礎研究等方面具有巨大的價值。抗體由四條多肽鏈構成,兩條重鏈和兩條輕鏈,通過二硫鍵連接而成。它們通常被糖基化,......
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本方法適用于應用反相高效液相色譜進行重組人腫瘤壞死因子衍生物的純度分析。......