反向色譜流動相的pH值

  在以反相液相分離極性和離子型化合物時常采用緩沖溶液作為流動相。緩沖溶液應具有足夠高的離子強度，這樣可以避免出現不對稱峰和峰分裂。
    緩沖液應具有以下特征：
    1 在pH=2~8之間要有足夠大的緩沖容量；
    2與檢測器匹配；
    3可以與為了改善分離添加的有機溶劑混溶；
    4 能促進平衡速度的提升；
    5 可以掩蔽吸附劑表面上的非特異活性位點。
    通常不使用乙酸鹽緩沖溶液，因為它與帶陽離子的溶質會形成非極性配合物；也不用鹵化物，以免腐蝕液相色譜儀。
    流動相的pH值對可解離溶質的影響很大，直接影響到其帶電狀態和疏水性，所以在分離肽類和蛋白質等大分子時，經常要加入修飾性的離子對試劑。

    強酸或強堿等離子化的溶質，在反相鍵合相上的保留值很低，常在接近于死時間流出。根據離子對色譜的原理將一種與樣品離子電荷相反的離子，加入到流動相中，使其與樣品離子結合生成弱極性的離子對，即中性締合物，增強樣品的疏水性，使保留值加大，達到適宜的分離效果。