原代細胞的脂類染色方法蘇丹紅Ⅲ染色法

原理：

蘇丹紅染料在脂類物質中的溶解度大于其在溶劑中的溶解度，如果染料與含有脂類的試樣接觸，便有大量染料進入脂類物質的結構內，使這些結構呈紅色。多用蘇丹紅染料、油紅O、尼羅藍等溶于脂類的染料染色，使脂質呈色。也可用四氧化鋨染色，脂肪酸或膽堿可使四氧化鋨還原為二氧化鋨而呈黑色。

配制試劑：

1.蘇丹紅Ⅲ染色液：將1g蘇丹紅Ⅲ溶于加溫的70%乙醇溶液中過濾備用；

2.甲醛鈣固定液：將10ml甲醛和1g CaCl₂混合加水至100ml；

3.甘油明膠：將12g明膠加入120ml蒸餾水中水浴加熱使其完全溶解，再加入60ml甘油和1g苯酚，充分混勻后即得。于4℃儲存備用；

染色步驟：

1.用Hanks液漂洗蓋玻片3次；

2.用甲醛鈣固定液固定20min；

3.用蒸餾水漂洗蓋玻片3次；

4.用70%乙醇將蓋玻片沖洗3次；

5.用蘇丹紅Ⅲ染色液覆蓋蓋片樣品，染色10—30min；

6.用70%乙醇漂洗蓋片3次；

7.用甘油明膠封片后觀察；

結果：

原代細胞含脂類的區域呈橘紅色；