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    發布時間:2021-05-23 20:30 原文鏈接: 單細胞分離用于單細胞基因擴增

     單細胞分離連接不同管徑大小的毛細玻璃針,可分離捕獲各種非貼壁狀態的單細胞和微粒等,如細菌、酵母、藻類細胞、植物花粉、原生動物單細胞、懸浮細胞、血液細胞、免疫細胞、卵細胞、各種懸液中單細胞及特殊標記的單細胞等。

      單細胞分離用于各種類型的細胞分離培養、純化、檢測;獲得單克隆細胞;用于單細胞基因擴增,用于單細胞測序等。從異質性的細胞群體中分離單細胞,目前主要有三種選擇:手動分離、熒光激活細胞分選和微流體技術。當然,除了成熟的方法,巧妙的新方法也在不斷涌現,能以更高的準確性和特異性來分離單細胞。

      如果你想要的細胞已經處于懸浮狀態(比如循環腫瘤細胞),而且含量相對比較豐富,那么流式分選將是你的理想選擇。如果樣本是實體組織,我們可以用酶分解掉膠原和其他細胞外蛋白。不過,酶學消化對細胞影響較大,甚至可能改變基因轉錄情況。把組織細胞制備成懸液之后,我們就可以通過特異性的熒光標簽分離出自己想要的細胞,進一步拿到單細胞是比較棘手的一步,也許要借助微流體設備。

      將細胞分散到懸液中,會失去它們在組織里的位置信息。激光捕獲顯微切割技術通過掃描組織切片來定位感興趣的細胞,并將其提取出來,操作者需要小心,以免切到細胞或細胞核。數量稀少的細胞只能用毛細管等器具手動獲取。




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