北大魏文勝權威期刊連發重要成果

　　北京大學生命科學學院魏文勝研究員帶領的課題組，致力于基因組編輯、疾病與感染方面的科學研究。著重發展真核基因修飾技術（i.e. TALE & CRISPR系統）及高通量功能基因組學，在此基礎上通過多種手段研究人源宿主細胞參與病原微生物感染的蛋白、信號通路及分子機制，為發展宿主導向的治療手段提供新的藥物靶點和思路。在生物技術方面關注真核基因定點修飾、功能基因組學以及基因治療；對疾病與感染的機制研究，特別關注艱難梭菌（Clostridium difficile）毒素侵染機制以及病毒性肝炎（i.e. HCV）的致病機理和治療。

　　2014年在《Nature》發表的一項研究中，他們開發出一種基于CRISPR/Cas9系統的慢病毒聚焦型人源細胞文庫、功能性基因篩選平臺以及基于高通量深度測序技術解析數據的完整技術路線。利用這一高效的新型遺傳篩選技術，成功鑒定出對兩種細菌毒素侵染宿主所必需的宿主受體、以及多種新型蛋白位點。2015年，魏文勝研究員帶領的課題組相繼在國際學術期刊發表多項重要研究成果。

　　一月份，他們與華南理工大學、美國馬里蘭大學的研究人員合作，在《Cell Research》發文，首次確定了艱難梭菌關鍵毒力因子TcdB的細胞受體CSPG4，并通過TALEN和CRISPR/Cas9介導的基因敲除，證實了它在人類細胞中的作用，為艱難梭菌感染的治療提供了一個新的治療靶點。相關新聞：北大魏文勝Cell Res解析艱難梭菌毒素侵染機制。

　　三月三日，魏文勝研究員在國際著名學術期刊《FEBS Journal》發表當今熱門技術CRISPR-Cas9系統的綜述文章，在文章中他概述了CRISPR-Cas9文庫介導的功能性篩選的一般程序、系統優化策略以及這種新遺傳工具的應用。

　　三月九日，魏文勝課題組與清華大學、美國阿拉巴馬大學伯明翰醫學院的研究人員合作，在Nature子刊《Scientific Reports》發表題為“A Dual-reporter system for real-time monitoring and high-throughput CRISPR/Cas9 library screening of the hepatitis C virus.”的研究論文。這項研究的研究對象是丙型肝炎病毒（HCV）——慢性肝炎、肝硬化和干細胞癌的主要原因，感染全球約1.7億人。雖然目前已經開發出幾種報告系統，但是許多缺點限制了它們在HCV感染評估中的應用。鑒于此，該研究小組報道了一種實時活細胞報告系統，稱為NIrD系統，提供了一個開關專門響應HCV感染。研究人員使用NIrD系統和一個集中的CRISPR/Cas9文庫，將CLDN1、OCLN和CD81確定為HCV無細胞進入和細胞間傳播的必需基因。將這種超敏感的報告系統和CRISPR敲除篩選相結合，為確定HCV感染的關鍵宿主組件，提供了一種強有力和高通量的策略。

　　五月八日，魏文勝課題組又在細胞自噬國際權威期刊《Autophagy》發表一項重要研究成果，題為“Divergent roles of BECN1 in LC3 lipidation and autophagosomal function”。 BECN1/Beclin 1被認為是III型磷脂酰肌醇3-激酶（PtdIns3K）復合體觸發哺乳細胞自噬的一個關鍵組件。盡管其在許多細胞和生理過程中發揮重要的作用，但是 BECN1在自噬中的確切作用仍存在爭議。在這項研究中，研究人員用TALEN技術，制備了一個BECN1敲除的人類細胞系。令人驚訝的是，BECN1的完全缺失對LC3 (MAP1LC3B/LC3B)脂化的影響不大。電子顯微鏡（EM）分析顯示，經氨基酸饑餓處理后，BECN1缺陷可導致包含多層細胞膜的畸形自噬體樣結構。研究人員進一步證實，PtdIns3K復合體活性和自噬潮（autophagy flux）在BECN1-/-細胞中是被破壞的。這些結果表明，BECN1在自噬體的功能性形成中（而不是LC3B脂化），發揮至關重要的作用。