美國衛生部（DHHS）及物質濫用和精神健康服務管理局（SAMHSA）制訂了美國聯邦藥物測試項目中關于尿液中各項藥物測定的強制指南。該指南規定，在尿液樣品藥品測試報告陽性結果之前，需要實驗室進行初始藥物測定和藥物確證兩步分析測定。本文建立了符合美國聯邦藥物測試項目要求的尿液中類交感胺類藥物的分析方法。
根據DHHS與SAMHSA制訂的尿液中各項藥物測定的強制指南規定：初始藥物測定通過免疫分析篩查5個藥物類別（如安非他明、可卡因、鴉片、苯環利定和大麻），免疫篩查法包括放射免疫檢測（RIA）及酶免疫檢測（EIA，EMIT）等。免疫篩查樣品測定結果為陽性需要進一步的色譜分離確證和質譜鑒定。SAMHSA規定5種氨基藥物 （AMP、MAMP、MDA、MDMA和 MDEA）分析方法定量限近似為250ng/ml。
實驗概述
確證分析尿液中的藥物主要需進行以下7個步驟：
在尿液樣品中加入氘代內標；
調節尿液的pH值；
水解尿液（僅鴉片和大麻）；
固相萃取（SPE）尿液中的藥物，蒸發至干；
衍生萃取物（PCP除外）蒸發至干；
有機溶劑復溶；
注入1~3μl至氣相色譜質譜聯用儀，使用3離子比例的報告鑒定及定量測定。
圖1. HFBA衍生工具的安非他明和甲基安非他明（100ng/ml尿液）色譜圖。
玻璃器皿
所有的玻璃器皿，包括自動進樣瓶和小體積的進樣瓶內插管必須進行硅烷化處理，以防止樣品吸附。將所有的玻璃器皿在10%DMDCS/甲苯溶液中浸泡10min，依次采用甲醇、正己烷清洗，然后風干。
實驗試劑
PFPA=PFAA=五氟丙酸酐Campbell Scientific （Rockton，1L）；
HFBA=七氟酪酸酐Campbell Scientific （Rockton，1L）；
TFAA=三氟乙酸酐Campbell Scientific （Rockton，1L）；
醋酸100mM=2.86ml冰醋酸加入500ml的水中；
磷酸緩沖鹽100mM pH6=1.7g Na2HPO4+12.14g Na2HPO4加入1L水中溶解，pH偏高用100mM NaH2PO4調節，pH偏低則用100mM Na2HPO4調節。
二氯甲烷/異丙醇/氨水（78：20：2） 萃取溶劑=40ml IP-OH+4ml conNH4OH+ 156ml MeCl2，每天新配。
藥物標準品及氘代內標為Cerillant （Round Rock，TX），內標物：d5或d8-安非他明，d5或者d8-甲基苯丙胺。
儀器設備
氣相色譜：PerkinElmer Clarus 680氣相色譜；
進樣口： 毛細管注射器使用壓力脈沖無分流進樣，250℃；
進樣口襯管：SiltekTM帶有玻璃毛（Cat. No.N6502010）；
氣相色譜柱： Elite-5（5%苯基/ 9 5%甲基硅烷）12m×0.2mm×0.33μm（Cat. No. N9316110），載氣He流速2.0ml/min；
氣相爐溫：60℃保持1min，再以40℃/min升溫至300℃，保持1min，總計8min；
壓力脈沖無分流進樣：該程序是在進樣過程中增加進樣口壓力，從而使更多的樣品以很窄的帶寬進入色譜柱，然后減少載氣的流速至色譜的正常操作線速度。程序的時間設置如下：
在-0.71min，CAR2設置為5ml/min（進樣之前增加壓力）；-0.7min SPL2設置為0（無分流進樣）；
0.7min CAR2設置為2ml/min（進樣后正常流速）；0.8min設置SPL2為50（進樣后，打開分流閥）。
質譜：PerkinElmer Clarus SQ 8 MS， 270L/sec分子渦輪泵，EI模式。選擇離子監測（SIM）模式采集數據，每個離子采集20~50ms。主要離子用于鑒定和定量分析，另外兩個離子用于確證及鑒定。3個離子色譜峰的頂點必須在標準品掃描的保留時間±2之內，離子比例與標準品的離子比例相差不超過20%。氘代的內標可以僅選擇兩個離子：一個主要離子和一個確證離子。