| 實驗材料 | 蛋白質 |
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| 試劑、試劑盒 | SE緩沖液 |
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| 儀器、耗材 | 層析柱 |
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| 實驗步驟 | 1. 用已脫氣HPLC級水洗去SE柱的貯存溶劑，流速1 ml/min。在室溫以已脫氣的SE緩沖液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基線穩定。
2. 注射100 μl 緩沖液進行一次空白樣品的假層析，檢測器設定在210~220 nm，0.1~1.0 AUFS。適宜的設定一般是：100 pmol 時為0.1AUFS，500 pmol 時0.3，1 nmol 時0.5，2 nmol 時1.0 ；作圖速度為0.5 cm/min。
3. 在2 000 g 離心蛋白標準或蛋白混合物5 min 注射100 μl 上清，并重復步驟2操作。收集每個層析峰于不同的聚丙烯管子，并確定峰的洗脫體積。
4. 各分部組分脫鹽，并用Speedvac蒸發器除去溶劑。
5. 最后一個洗脫峰的保留時間不應超過第1個峰的2倍，如果不是這樣的話，流動相加20%甲醇以抑制蛋白與介質的結合。 展開 |
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分子排阻色譜法又稱凝膠色譜法，是利用被分離物質分子大小的不同導致在填料上滲透程度不同使組分分離；常用的填料有分子篩、葡聚糖凝膠、微孔聚合物、微孔硅膠或玻璃珠等，根據固定相和供試品的性質選用水或有機溶劑作為流動相。
