【鑒別】(1)取本品約10mg,置試管中,加水lml與硫酸2ml,混勻,溶解后放冷,沿管壁緩緩加硫酸亞鐵試液3ml,使成兩液層,接界面顯棕色。(2) 在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。(3) 本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜(光譜集473圖)一致。
【檢查】 硝酸鹽 取本品0.25g,加水5ml,振搖5分鐘,濾過,濾液置試管中加硫酸5ml,混勻,放冷,沿管壁緩緩加硫酸亞鐵試液5ml,使成兩液層,接界面不得立即顯棕色。有關物質 取本品,加流動相超聲使溶解并定量稀釋制成每lml中約含lmg的溶液,作為供試品溶液;另精密稱取2 -單硝酸異山梨酯對照品和單硝酸異山梨酯對照品,精密稱定,加流動相溶解并定量稀釋制成每lml中各約含0.5mg的混合溶液,精密量取lml,置100ml量瓶中,再精密加人供試品溶液lml,用流動相稀釋至刻度,搖勻,作為對照溶液。照髙效液相色譜法(附錄V D )試驗。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水(25 :75)為流動相;檢測波長為210nm。取對照溶液20μl,注入液相色譜儀,調節檢測靈敏度,使硝酸異山梨酯峰的峰高約為滿量程的20% ,2-單硝酸異山梨酯峰與單硝酸異山梨酯峰的分離度應大于2.0。在精密量取供試品溶液和對照溶液各20pl,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分峰保留時間的1.1倍,供試品溶液的色譜圖中如有與2 -單硝酸異山梨酯峰與單硝酸異山梨酯峰保留時間一致的色譜峰,按外標法以峰面積計算,均不得過0.5%,其他單個雜質峰的峰面積不得大于對照溶液中硝酸異山梨酯峰面積的0.5倍(0.5 %) ,雜質總量不得過1.0 %。干燥失重 取本品,置硅膠干燥器中,干燥至恒重,減失重量不得過0.5% ( 附錄Ⅷ L )。
【含量測定】照高效液相色譜法(附錄V D)測定。色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水(54:46)為流動相;檢測波長為230nm。理論板數按硝酸異山梨酯峰計算不低于5000,硝酸異山梨酷峰與相鄰雜質峰的分離度應符合要求。測定法 取本品約25mg,精密稱定,置50ml量瓶中,加甲醇適量使溶解,用流動相稀釋至刻度,搖勻,精密量取5ml,置25ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻,精密量取20μl,注入液相色譜儀,記錄色譜圖;另取硝酸異山梨酯對照品,同法測定。按外標法以峰面積計算,即得 [2] 。