淋菌培養是診斷淋病的重要依據之一。對于婦女淋病及男性慢性淋病在臨床診斷符合淋病而涂片檢查陰性者均應做淋菌培養。常用的培養基有血瓊脂和巧克力瓊脂，以及Thither-Martin（M-T）培養基。培養的最適條件是潮濕的含3%～10%二氧化碳的環境，溫度為35～37℃，許多淋球菌可生長在沒有外源性二氧化碳供給的增菌培養基中。經數次人工培養后，淋球菌的發育變得容易，可以不需要二氧化碳，且也能在普通培養基中生長。培養淋球菌的培養基的pH值以7．4為好。經24～48小時觀察菌落形態及菌體形態特征，菌落特征為圓形、中央隆起，淺白或淡灰色半透明，表面光滑。