照高效液相色譜法（通則0512）測定。
1、供試品溶液
取本品約50mg，精密稱定，置50mL量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5mL，置50mL量瓶中，用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻。
2、對照品溶液
取左氧氟沙星對照品適量，精密稱定，加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1mL中含0.1mg的溶液。
3、系統適用性溶液
取左氧氟沙星對照品、環丙沙星對照品和雜質E對照品各適量，加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成每1mL中約含左氧氟沙星0.1mg、 環丙沙星和雜質E各5μg的混合溶液。
4、色譜條件
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以醋酸銨高氯酸鈉溶液（取醋酸銨4.0g和高氯酸鈉7.0g，加水1300mL使溶解，用磷酸調節pH值至2.2）-乙腈（85:15）為流動相，檢測波長為294nm，進樣體積10μL。
5、系統適用性要求
系統適用性溶液色譜圖中，左氧氟沙星峰的保留時間約為15分鐘，左氧氟沙星峰與雜質E峰和左氧氟沙星峰與環丙沙星峰之間的分離度應分別大于2.0與2.5。
6、測定法
精密量取供試品溶液與對照品溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算供試品中C18H20FN3O4的量。