1）脫蠟、水化組織切片。
2）根據所應用的一抗的特殊要求，對組織切片進行預處理。
3)0.3%或3%H2O2去離子水孵育5分鐘-30分鐘，以阻斷內源性過氧化物酶，PBS或TBS沖洗。
4）滴加一抗，室溫或37℃孵育30~60分鐘，或4℃過夜，PBS或TBS浸洗3分鐘×5次。
5）滴加enhangcer增強劑，37℃30min，PBS或TBS浸洗3分鐘×5次。
6）滴加通用型IgG抗體-Fab段-HRP多聚體，室溫/37℃孵育30分鐘-1h，PBS/TBS沖洗，3分鐘×5次。
7）應用DAB溶液顯色。
8）蒸餾水沖洗、復染、脫水、透明、封片。