什么是牛血清白蛋白，他的作用、用途保存方法有哪些？

一、定義：
牛血清白蛋白（BSA），是牛血清中的一種球蛋白，包含607個氨基酸殘基，分子量為66.446KDa，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用。

二、主要成分
1、蛋白質
是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白，球蛋白。纖維粘連素細胞促進細胞附著；α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用；胎牛血清中含胎球蛋白促細胞附著；轉鐵蛋白能結合鐵離子，減少其毒性和被細胞利用。
2、多肽
血小板促生長因子能促細胞分裂，是多肽家庭的主要成員之一，是主要的促細胞增殖因子；成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經細胞生長因子等，血清中含量雖很少，但對細胞生長也有一定作用。
3、激素
激素對細胞的作用是多方面的。
胰島素：促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸，與促細胞分裂有關。
類胰島素生長因子：能與細胞表達的胰島素受體結合，從而有胰島素同樣的作用。
促生長激素：促細胞增殖效應。

4、其他成份
氨基酸、葡萄糖、酮酸等對多種營養成分的合成培養基意義不大。與蛋白相結合狀態的微量元素對細胞培養有意義。

三、作用
BSA一般做為穩定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應液中，因為有些酶在低濃度下不穩定或活性低。加入BSA后，它可能起到“保護”或“載體”作用，不少酶類添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會受到什么影響。對多數底物DNA而言，BSA可以使酶切更完全，并可實現重復切割。在37℃，酶切反應超過1h時，BSA可以使酶更加穩定，因為在不含BSA的反應緩沖液中，許多限制性內切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內切酶活性的金屬離子和其它化學物質。

緩沖液
1.BSA是酶的穩定劑，防止酶的分解和非特異性吸附；
2.BSA能減輕有些酶的變性，能減輕有些不利環境因素如加熱，表面張力及化學因素引起的變性的，可能是因為它結構中有17個二硫鍵，和一個巰基，巰基的化學反應很活潑，二硫鍵有抗氧化還原的作用，因此可與多種陽離子，陰離子和小分子結合；
3.BSA能防止酶吸附到管壁而損失。

四、用途
1、用于生化研究、遺傳工程和醫藥研究
2、用作醫藥保健食品、調味品
3、維持滲透壓、pH緩沖、載體作用
4、在PCR體系中有助于Taq酶的穩定性及活性，可以提高PCR的效率

五、儲存方法
每10克加100毫升水進行溶解，或用 PBS溶解也可，視用途而決定。然后分裝成小支。若不使用防腐劑可貯存在零下20或30攝氏度的恒溫柜中，若使用防腐劑則可貯存在零上4攝氏度的環境下。一般可存放數月不變質。防腐劑可能對牛血清白蛋白的效果造成影響，應慎用。

六、應用
牛血清白蛋白（BSA）在生化實驗中有廣泛的應用, 例如在WB實驗中加入BSA, 通過提高溶液中蛋白質的濃度，對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附，能減輕有些酶的變性，減輕不利環境因素如加熱，表面張力及化學因素引起的變性的。

1、測定蛋白濃度
按50：1配置BCA工作液。10ulC液（蛋白標準）+90ulPBS液稀釋成0.5mg/ml的蛋白標準液。再分別以0、1、2、4、8、12、16、20ul將蛋白標準液加入96孔板的第1~8標準孔中，在其他樣品孔中加入10ul待測樣品。分別加PBS定容至20ul。各孔中加入200ulBCA工作液，室溫放置2小時。用酶標儀測定蛋白濃度：測定A562，依標準曲線算出蛋白濃度。

2、SDS-PAGE電泳
（1）制 膠: 按比例配制分離膠，緩緩地搖動溶液，使激活劑混合均勻，將凝膠溶液平緩地注入兩層玻璃極中，再在液面上小心注入一層水，以阻止氧氣進入凝膠溶液中，靜置40min。同前按比例配制濃縮膠，但混勻溶液時不要過于劇烈以免引入過多地氧氣。吸去不連續系統中下層分離膠上的水分，連續平穩的注入凝膠溶液，然后小心插入梳子并注意不得在齒尖留有氣泡，靜制60min以上以保證完全聚合。
（2）預電泳： 將聚合好的凝膠安置于電泳槽中，小心拔去梳子，加入電泳緩沖液后低電壓10-20V的預電泳20-30min。（目的是清除凝膠內的雜質， 疏通凝膠孔徑以保證電泳過程中電泳的暢通）。
（3）樣品準備：首先計算上樣體積，然后按樣品：上樣buffer=4：1的比例加入上樣bufer混勻，沸水10分鐘，冰上5分鐘。
（4）加 樣： 預電泳后依次加入標準品（Marker）和待分析樣品。（加樣時間要盡量短，以免樣品擴散，可在未加樣的孔中加入等量的樣品緩沖液避免邊緣效應。每個泳道加5ul 。
（5）電 泳： 加樣完畢，選擇80V恒壓進行電泳，電泳直至溴酚藍染料前沿到達兩膠交界處（一般約20分鐘），更換至100V恒壓電泳，電泳直至溴酚藍染料前沿下至凝膠末端處，即停止電泳（一般約為1小時20分鐘）。