實驗概要
人單個核細胞的分離
主要試劑
DPBS、0.5%甲基纖維素、人淋巴細胞分離液、人HSCs培養液
主要設備
離心機，超凈臺，體視鏡，倒置顯微鏡，96孔培養板，T75培養瓶，25mL/10mL/5mL移液管
實驗材料
臍帶血100 mL，取自醫院，并和產婦簽知情同意書
實驗步驟
（1）用血袋從醫院取臍帶血100 mL左右，移至T75培養瓶中，并按1:1的比例加入DPBS稀釋臍帶血，混勻后再按4:1的比例加0.5%甲基纖維素，輕輕混勻后室溫靜置30～45 min。
（2）待紅細胞自然沉降至界限分明時，用移液管吸出上清到50ml的移液管。
（3）室溫1500 r/min或者300 g離心5 min。
（4）棄上清，加5 mL的DPBS重懸細胞。
（5）預先在15 mL離心管中加入5 mL淋巴細胞分離液，靜置3～5 min后再沿管壁緩慢加入第（4）步的5 mL細胞懸液，室溫1500 r/min或者300 g離心20 min。
（6）離心結束后取出離心管，觀察分層情況，收集單個核細胞界面（中間白膜層）的液體，用5～10 mL DPBS洗滌，然后取少量細胞用0.5%臺盼蘭染色計數活細胞。一般情況下100 mL的血能收集到1x108個單個核細胞。