實驗材料 毒株標準血清
試劑、試劑盒 牛血清Hanks 氏液瓊脂糖
儀器、耗材 水浴鍋24孔板孵箱
實驗步驟
一、試驗目的
血清分型。
二、實驗材料準備
1. 標本
出血熱恢復期病人血清
2. 材料
（1） 毒株 漢灘病毒標準株 76-118，漢城病毒標準株 Seoul；
（2）標準血清 兔抗漢灘病毒、漢城病毒血清；
（3）空斑減少中和試驗常用試劑。
三、步驟
1. 將待檢血清用牛血清Hanks 氏液稀釋成1：10，56℃滅活30分鐘；
2. 進一步2倍稀釋血清成1：20、1：40、1：80……，對照血清1：10稀釋；
3. 稀釋兩種病毒（在冰浴中進行）至含200 pfu/ml；
4. 各連續稀釋度血清分別與200 pfu/ml的兩種病毒液等量混合（各0.3 ml），置37℃中作用1小時（每15分鐘振蕩一次）；
5. 吸出各細胞培養孔中維持液；
6. 接種長滿單層的Vero-E6細胞（24孔板），每孔接種血清病毒混合液、標準血清對照及兩種病毒對照 ，每稀釋度兩孔，100 ul/孔。37℃吸附1小時，每隔15分鐘搖動一次；
7. 加第一層瓊脂糖覆蓋液（需冷置42℃左右），每孔1 ml，室溫下待凝固，細胞面朝上，置37℃5%CO2孵箱培養7-9天；