利用桿狀病毒表達系統,在昆蟲細胞內生產EBOV GP蛋白并純化后,免疫豚鼠1次, 或在免疫 DNA 疫苗后作為加強免疫,可誘導產生較高水平的抗體,但不能保護機體免遭病毒的攻 擊,且保護率與中和抗體水平間無對應關系。
病毒樣顆粒(virus-like particles, VLPs)以其獨 特特點吸引研究者關注:可對免疫個體進行多次免 疫;由于 VLPs 空間結構與天然病毒相似,因此誘導中和抗體的能力比可溶性抗原更強;VLPs 易被抗 原提呈細胞(如樹突狀細胞)捕獲,從而刺激機體產生抗體和細胞免疫反應;可將免疫刺激分子融合表 達于 VLPs 中,用以增強免疫反應。最早的研究 是將表達 GP 和 VP40 蛋白的 DNA 載體轉染人293T 細胞后獲得 EBOV VLPs,3 次免疫后,可保護小鼠。如果在 VLPs 中加入佐劑, 2 次免疫小鼠即可抵抗高劑量病毒的攻擊,免疫 1 次就可保護豚鼠, 還可保護非人靈長類,首次證明非病毒載體疫苗在非人靈長類模型中可激發保護性免疫反應。此外,也可利用昆蟲細胞生產 VLPs,其形態和功能均與在哺乳動物中生產的相似,可在小鼠體內激發有效的保護反應。使用昆蟲細胞生產提高了產量,大幅度降低了生產成本,且昆蟲細胞更安全,但須在非人靈長類模型中驗證其有效性。