1、PCR基本要素
PCR基本要素與DNA復制的基本要素是一致的。
①DNA模板：待拷貝的 DNA 稱為模板，它可以是雙鏈 DNA 也可是單鏈DNA，最后擴增得到的產物是雙鏈狀態的。
②引物：是 DNA 復制的先鋒，就象結晶過程中的晶核，引導 DNA 的合成。在 PCR 擴增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
③DNA 聚合酶（TaqDNA聚合酶）：是 DNA 復制的動力，在 dNTP 等底物存在時在引物的引導下沿著模板 DNA 合成互補的 DNA 鏈。
④緩沖液：提供DNA合成反應所需的PH,離子強度等環境。
⑤4種單核苷酸：dNTP，提供DNA合成原料。
2、PCR原理
類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成。
① 模板DNA的變性：模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備；
② 模板DNA與引物的退火(復性)：模板DNA經加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合；
③引物的延伸：DNA模板--引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈重復循環變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2～4分鐘，2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍(Plateau)。 到達平臺期所需循環次數取決于樣品中模板的拷貝。在此同時認識到蛋白質是接受RNA的遺傳信息而合成的。
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