經典的乳糖耐量試驗是口服乳糖后檢測血葡萄糖水平，從而評估乳糖酶缺乏的狀況。此外，乙醇乳糖耐量試驗和乳糖氫呼氣試驗也屬于乳糖耐量試驗的范疇。
1．檢查前準備
（1）檢查前需空腹12小時。
（2）乳糖氫呼氣試驗檢查前一天需禁食乳類、豆類及麥制品等產氫食物。
2．操作方法
（1）經典的乳糖耐量試驗：空腹12小時后早晨測定空腹血糖水平，口服乳糖50g（兒童2g/kg，最多每次40g）后，每半小時抽血測血糖，共2小時。
（2）乙醇乳糖耐量試驗：空腹12小時后測定空腹時血及尿半乳糖濃度。先口服乙醇500mg/kg（兒童150mg/kg），10分鐘后口服乳糖50g（兒童2g/kg，最多每次40g），40分鐘后再次留取血和尿標本檢測半乳糖濃度。
（3）乳糖氫呼氣試驗：空腹12小時后測定空腹呼氣含氫量變化。乳糖酶缺乏受試者服用乳糖后，未被水解的乳糖進入結腸被細菌發酵會產生大量的氫氣，一部分氫氣會經血液由肺部呼出，因此測定受試者口服乳糖后呼氣含氫量變化，可診斷乳糖酶缺乏的狀況。空腹口服乳糖25g或50g（兒童1g/kg，最多每次25g）后，向儀器用力吹氣獲得呼氣中的氫值，每隔30分鐘測一次，共6次。