（1）原理：在二磷酸腺昔（ADP）存在的條件下丙酮酸激酶（PK），催化磷酸烯醇丙酮酸（PEP）轉化成丙酮酸，在輔酶Ⅰ還原型（NADH）存在情況下，丙酮酸被LDH轉化為乳酸。若標記熒光于NADH上，此時有熒光的NADH變為無熒光的NAD.
參考值：正常熒光在20min內消失。l5.0±1.99IU/gHb（37℃）（ICSH推薦Blume法）
（2）臨床意義：PK嚴重缺乏者熒光60min不消失；PK中等缺乏者熒光25～60min消失。純合子PK值在正常活性到25%以下，雜合子為正常25%～50%.