膽紅素是體內衰老的紅細胞經網狀內皮系統的破壞和肝臟轉化的代謝產物,其含量的變化對疾病的診斷具有重要意義。總膽紅素的檢測方法常用的有重氮試劑法、膽紅素氧化酶法以及直接分光光度計法。作者采用二氯苯重氮鹽法(DPD法)的兩種試劑盒以及Roche Modular P和Bayer RA-1000型生化分析儀,檢測血清和血漿總膽紅素(TBil),結果報告如下。
1 材料與方法
1.1 標本采集 選擇98例來我院的體檢者,隨機分成兩組每組49例。按常規方法抽取靜脈血4 ml,注入普通干燥管中2 ml置37℃水浴30 min后離心分離血清。另外2 ml注入肝素鈉抗凝管中(每ml血中肝素鈉含量為25 U),混勻后立即分離血漿。
1.2 檢測方法
1)采用Roche Modular P生化分析儀和Roche公司提供的DPD法總膽紅素檢測試劑盒,雙試劑、雙波長(546 nm,600 nm),并采用Roche cfs和Precinorn-u質控物進行校準和室內質控。對49例被檢測者的血清和血漿TBil進行檢測。
2)同時應用Bayer RA-1000型生化分析儀和中生北控生物科技股份有限公司生產的DPD法TBil檢測試劑盒。雙試劑臨用前配成工作液,檢測波長為550 nm,并同時用該公司的質控品做室內質控。
1.3 數據處理 采用SPSS 10.0軟件進行統計學處理,計量資料采用t檢驗和配對資料的χ2檢驗。
2 結果
采用Roche和中生試劑在Roche Modular P和Bayer RA-1000生化分析儀,檢測血清和血漿TBil結果(表1)。 結果表明,采用Roche原裝試劑和生化分析儀所檢測的血清和血漿TBil無顯著性差異(P>0.05);使用中生試劑和Bayer RA-1000型生化分析儀檢測的血漿TBil明顯高于血清TBil,差異有非常顯著性(P<0.01)。
3 討論
TBil的檢測方法常用的有重氮試劑法、膽紅素氧化酶法和直接分光光度計法。重氮試劑法中又有改良J-G法、二氯苯重氮鹽(DPD)法和二甲亞楓法等多種方法。作者采用DPD法檢測原理,由Roche公司生產的原裝試劑盒和生化分析儀雙波長(546 nm,600 nm)檢測血清和血漿TBil,結果無顯著性差異(P>0.05),而采用中生試劑公司生產的試劑盒在Bayer RA-1000型生化分析儀單一波長(550 nm)檢測的血漿TBil明顯高于血清TBil,結果有非常顯著差異(P<0.01)。結果表明不同儀器和不同廠家生產的試劑盒檢測血漿和血清TBil其結果是有差異的。這與李美珠[1]等人應用奧林巴斯AU5400生化分析儀以及和光純藥工業株式會社提供的釩酸鹽氧化法檢測血漿TBil 14.90 μmol/L,血清TBil 14.27 μmol/L(t=1.93);以及陰斌霞[2]等應用日立7170A生化分析儀、日本第一化學株式會社提供的試劑盒檢測血漿TBil 11.58 μmol/L、血清TBil 9.06 μmol/L(t=2.084);閃金忠[3]等所檢測的血漿TBil 19.2 μmol/L、血清TBil 18.8 μmol/L(t=1.08)是有所差別的。作者認為其差別可能與不同檢測方法、不同試劑盒和不同儀器等多因素的方法不同有關。WHO于2002年發表的專題報告中推薦在56項臨床檢測項目中使用血漿[4],不僅可以提高檢驗速度,還可以避免細胞內成分的釋出后對結果的影響。作者應用Roche試劑和儀器檢測血漿和血清TBil其結果未見顯著性差異,建議為了準確檢測血漿TBil,應采用更穩定且不易受諸因素干擾的試劑盒和高精度的生化分析儀。
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