EDTA-K2 作為血常規檢驗的常用抗凝劑,具有對白細胞、紅細胞形態影響極小,并可抑制血小板的聚集等優點,但它有時會誘導血小板體外黏附、聚集,使血細胞自動分析儀不能正確識別,導致血小板計數明顯低于正常值,從而導致血細胞自動分析做血小板計數時出現血小板假性減低的現象,這就是EDTA依賴性假性血小板減少癥( EDTA-PTCP)。現將近期工作中遇到的典型病例報道如下。
1 臨床資料
1.1 一般資料 選取2008年1月—2009年3月血小板計數結果異常減低的病例6 例,其血小板計數結果均≤50 ×109/L ,且臨床反饋信息與臨床癥狀嚴重不符,查體未見皮膚紫癜、牙齦出血、鼻出血、胃腸道及泌尿系統出血等癥狀。骨髓穿刺結果顯示增生活躍,巨核細胞無明顯異常,成熟巨核細胞數量不少,血小板成堆分布。
1.2 方法
1.2.1 法 分別采用EDTA-K2、肝素及枸櫞酸鈉抗凝的真空采血管空腹抽取肘正中靜脈清晨靜脈血2. 0 mL,使用System XE-2100全自動分析儀進行檢測。
1.2.2 手工法 目視計數法,床邊采血使用許汝和稀釋液即時稀釋,按全國操作規程進行計數。
1.2.3 血液涂片法 取靜脈血制成血液涂片1張,干燥后使用瑞氏染色法進行染色,下觀察。
2 結果
2.1
3種抗凝劑血小板檢測結果 EDTA-K2 抗凝劑血小板檢測結果( 29 ～ 68 ) ×109/L (報警信息中提示Plt CLUMPS)
,肝素抗凝劑血小板檢測結果( 100 ～162 ) ×109/L ,枸櫞酸鈉抗凝劑血小板檢測結果(102～172) ×109/L
,手工法血小板檢測結果(121～201) ×109/L ,血液涂片法在顯微鏡下可以觀察到血小板有明顯聚集成簇現象(每簇中血小板數目大于6個)
,少見血小板單獨存在。見表1(略)。
2.2 復檢 選取其中1例與臨床聯系后重新采用EDTA -K2 抗凝劑抽血立即上機檢測,血小板檢測結果103 ×109/L ,并且分別于抽血后1 h、2 h、3 h、4 h上機檢測,血小板檢測結果依次為88 ×109/L , 67 ×109/L, 42 ×109/L, 21 ×109/L。
3 討論
據文獻報道, EDTA-PTCP在住院患者的發生率為0. 09%～0. 21% ,在門診的血小板減少患者中,其比例可高達17%。發生機制是由于在EDTA-K2 作為抗凝劑的前提下出現的介導血液中冷抗血小板自身抗體,使血小板互相發生凝集現象 。Bragnani 等認為, EDTA 可導致血小板活化,因而改變血小板膜表面某種隱匿性抗原構象,與存在于血漿中的自身抗體結合,激活PLA、PLC、AA、ADP、5-HT 等活性物質。這些活性物質又能活化血小板纖維蛋白原受體,促使血小板與纖維蛋白原聚集成團,出現使血小板互相凝集現象。這種EDTA依賴的冷抗血小板自身抗體直接作用于血小板膜糖蛋白Ⅱb /Ⅲa上,同時這種與血小板結合的自身抗體Fc 端可與單核細胞或淋巴細胞膜上Fc 受體結合,出現衛星現象。其可能與血漿中的抗血小板抗體和抗心磷脂抗體等自身抗體有關,但無任何病理、生理意義,也與特殊藥物使用無關,多發生在腫瘤患者、自身免疫病、肺心病、晚期孕婦、肝病、毒血癥及一些不明原因的疾病。血細胞自動分析儀是根據血小板的體積大小及通過微孔時產生的脈沖數計數的,當血小板互相發生凝集時,會致使一些血小板被誤認為小紅細胞而不納入血小板計數范圍,使血小板計數減少。此種情況一旦發生,會導致臨床進行大量的下一步檢查,甚至導致誤診、誤治。如果懷疑EDTA-PTCP發生時,可以采用不同的方法進行復檢: ①目前用于評價血小板計數準確性的參考方法是血小板手工計數法,雖然其精密度較差,有時對血小板與某些非特異性顆粒也難以辨別,但對于異常血小板結果的復檢,仍不失為一種方便有效的方法。②直接用EDTA-K2 抗凝血標本進行血涂片,干燥后使用瑞氏染色法進行染色,顯微鏡下觀察血小板的分布情況,如果見到血小板大量凝集,可進一步復檢確診。③可以換用肝素及枸櫞酸鈉等非EDTA-K2抗凝劑進行血小板計數復檢,雖然計數結果與手工計數結果仍存在一些差異,不能作為最后結果報告臨床,但其對于排除EDTA-K2 引起的血小板聚集是一種非常可取的方法。